Nous avons mis au point une spectroscopie confocale multicolore \u00e0 mol\u00e9cule unique avec une sensibilit\u00e9 de d\u00e9tection optimis\u00e9e sur trois canaux spectralement distincts pour l'\u00e9tude des interactions biomol\u00e9culaires et du FRET entre plus de deux mol\u00e9cules. En utilisant des dispositifs acousto-optiques programmables comme s\u00e9parateur de faisceaux et filtre d'excitation, nous surmontons certaines des limitations des s\u00e9parateurs de faisceaux multichro\u00efques conventionnels et mettons en \u0153uvre une alternance rapide entre trois lignes laser. Cela permet de visualiser la synth\u00e8se des jonctions \u00e0 trois voies de l'ADN sur la base d'une seule mol\u00e9cule et de r\u00e9soudre sept sous-populations st\u0153chiom\u00e9triques ainsi que de quantifier le FRET en pr\u00e9sence de voies de transfert d'\u00e9nergie concurrentes. En outre, la capacit\u00e9 d'\u00e9tudier les mouvements mol\u00e9culaires corr\u00e9l\u00e9s en surveillant simultan\u00e9ment plusieurs distances au sein d'un complexe biomol\u00e9culaire est d\u00e9montr\u00e9e.<\/p>\n\n\n\n